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蛋白共提取試劑盒廠家中了解細(xì)胞總蛋白提取的方法

發(fā)布日期： 2017-03-13
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    蛋白共提取試劑盒適用于從各種原代或傳代細(xì)胞和各種實體組織，如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動物組織中提取線粒體蛋白。提取過程簡單方便。制備的線粒體蛋白不僅純度高，保持天然活性，而且絕少交叉污染。蛋白共提取試劑盒廠家介紹細(xì)胞總蛋白提取的方法。
    1. 裂解液制備：每500ul冷的Buffer I中加進(jìn)2ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
    2. 在4℃，1000rpm條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細(xì)胞。
    3. 用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
    4. 每5×106個細(xì)胞中加進(jìn)500ul冷的裂解液，混勻后，在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
    5. 在4℃，14000rpm條件下離心15分鐘。
    6. 快速將上清吸進(jìn)另一預(yù)冷的干凈離心管，即可得到總蛋白。